植物抗病性室内检测

因业务调整，部分个人测试暂不接受委托，望见谅。

检测项目

人工病原接种：采用孢子悬浮液（浓度1×10⁵~1×10⁶ spores/mL）或菌丝块穿刺法，控制接种温度22±2℃、湿度85%±5%

病程发展监测：记录病斑扩展速率（mm/24h）、侵染面积百分比（图像分析法精度±0.5%）及发病指数（0-9级）

过氧化物酶（POD）活性：比色法测定470nm吸光度，单位U/mg·min，检测限0.01U

苯丙氨酸解氨酶（PAL）活力：紫外分光法290nm测定，活性单位nmol·h⁻¹·g⁻¹FW

病程相关蛋白（PR蛋白）表达：Western Blot定量分析，检测β-1,3-葡聚糖酶等蛋白表达量（μg/mg）

活性氧爆发测定：DAB染色法量化H₂O₂积累强度，分光光度计检测波长560nm

胼胝质沉积观测：苯胺蓝荧光染色，激光共聚焦显微镜观测沉积厚度（μm级分辨率）

抗性基因表达量：qRT-PCR检测NBS-LRR类基因相对表达量（2⁻ΔΔCt法，Ct值变异系数<5%）

木质素沉积分析：间苯三酚-HCl显色法，测定木质素含量（mg/g DW）

水杨酸信号通路：HPLC-MS检测内源水杨酸含量（ng/g FW）

系统抗性诱导测定：远端叶片病原挑战实验，统计保护效应百分比（PE%）

检测范围

农作物抗病种质：水稻白叶枯病抗性基因型筛选（如Xa21/Xa23载体材料）

经济作物病原互作：烟草-烟草花叶病毒（TMV）超敏反应表型鉴定

蔬菜抗性育种：番茄灰霉病（Botrytis cinerea）离体叶片接种模型

林木抗逆评价：杨树溃疡病（Dothiorella gregaria）皮层侵染抗性分级

观赏植物病害：月季黑斑病（Diplocarpon rosae）抗性品系离体筛选

药用植物防御：黄芪根腐病（Fusariumoxysporum）抗性生理指标监测

转基因抗病材料：过表达NPR1基因拟南芥对假单胞菌抗性验证

真菌毒素抗性：玉米赤霉烯酮（ZEN）胁迫下防御酶活性动态变化

土传病害抗性：棉花黄萎病（Verticillium dahliae）水培根系侵染模型

病毒载体材料：携带CP基因的植物病毒抗性工程株系评价

检测标准

ISO 22032:2018 植物病原体人工接种操作规范

GB/T 3543.5-2021 农作物种子抗病性检测导则

ASTM D8412-21 离体叶片病害严重度数字化评估规程

ISO 11733:2021 植物防御酶活性测定技术通则

GB/T 39909-2021 植物抗病基因表达量qRT-PCR检测方法

UPOV TG/1/3 植物新品种抗病性测试指南

EPPO PP 1/135 林木病害抗性温室评价标准

GB/T 40456-2021 植物系统获得抗性诱导效应检测规范

ISO 21479:2019 植物病理学实验生物安全等级要求

ASTM E3088-17 植物抗病表型数据采集与统计分析指南

检测仪器

人工气候箱：温控范围5-45℃±0.5℃，光照强度0-30000lux可调，模拟昼夜交替环境进行接种后培养

全自动酶标仪：波长范围200-1000nm，支持96孔板动力学检测，用于POD/PAL等防御酶高通量分析

冷冻切片机：切片厚度1-100μm可调，-35℃低温操作，制备病原侵染界面组织样本

激光共聚焦显微镜：配备488/561nm激光器，Z轴分辨率0.1μm，观测胼胝质沉积及细胞超微结构变化

实时荧光定量PCR仪：检测通道≥4通道，温控精度±0.1℃，绝对定量抗病基因转录水平

高通量植物表型成像系统：RGB+荧光+近红外三模态成像，分辨率10μm/pixel，自动分析病斑扩展动态

超高效液相色谱质谱联用仪：质量精度<3ppm，检测水杨酸等信号分子痕量变化（LOQ=0.01ng/g）

便携式叶绿素荧光仪：测量Fv/Fm等参数，非损伤性评估病原胁迫下光合系统损伤程度

可控雾化接种设备：雾滴粒径10-50μm可调，压力0.2-0.5MPa，实现病原悬浮液均匀喷洒

全自动核酸提取工作站：通量96样本/批次，提取植物-病原互作界面总RNA用于转录组分析

检测流程

1、咨询：提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品，安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据，编写报告草件，确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件