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番茄黑环病毒检测

发布时间:2025-05-30

关键词:番茄黑环病毒检测案例,番茄黑环病毒检测机构,番茄黑环病毒试验仪器

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来源:北京中科光析科学技术研究所

文章简介:

检测项目病毒颗粒形态观察、基因组RNA提取与纯化、外壳蛋白抗原检测、核酸杂交分析、RT-PCR扩增、实时荧光定量PCR、等温扩增技术(LAMP)、ELISA免疫测定、WesternBlot验证、病毒分离培养、生物测定接种试验、症状学诊断分析、传播途径验证实验、寄主范围测定、血清学交叉反应测试、核酸序列比对分析、系统进化树构建、单克隆抗体制备验证、病毒载量定量分析、抗性基因筛查、分子标记开发应用、种子带毒率测定、土壤残留病毒检测、昆虫介体传毒能力测试、温度敏感性试验、化学药剂抑制效果评估、抗血清效价测定、假
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因业务调整,部分个人测试暂不接受委托,望见谅。

检测项目

病毒颗粒形态观察、基因组RNA提取与纯化、外壳蛋白抗原检测、核酸杂交分析、RT-PCR扩增、实时荧光定量PCR、等温扩增技术(LAMP)、ELISA免疫测定、WesternBlot验证、病毒分离培养、生物测定接种试验、症状学诊断分析、传播途径验证实验、寄主范围测定、血清学交叉反应测试、核酸序列比对分析、系统进化树构建、单克隆抗体制备验证、病毒载量定量分析、抗性基因筛查、分子标记开发应用、种子带毒率测定、土壤残留病毒检测、昆虫介体传毒能力测试、温度敏感性试验、化学药剂抑制效果评估、抗血清效价测定、假阳性排除实验、阴性对照设置验证

检测范围

番茄植株叶片样本(幼叶/成熟叶/黄化叶)、茎秆维管束组织样本(基部/中部/顶端)、果实表皮与果肉组织(青果期/转色期/成熟期)、根系分泌物样本(主根/侧根/根尖)、种子表面消毒样本(种皮/胚乳/胚芽)、育苗基质残留物样本(泥炭/蛭石/珍珠岩)、灌溉水样过滤浓缩物(地下水/雨水/循环水)、传毒介体昆虫样本(蚜虫成虫/若虫/卵)、温室栽培设施表面拭子(支架/滴灌头/工具)、周边杂草植株样本(龙葵/曼陀罗/苋菜)、嫁接接穗与砧木接口组织(劈接/插接/贴接部位)、组培苗无菌培养物(愈伤组织/再生芽体)、土壤剖面分层样本(0-20cm耕作层)、农用器械清洗液离心沉淀物(剪刀/嫁接刀/采收筐)、有机肥发酵产物浸提液(禽畜粪肥/秸秆堆肥)、花粉活力测试样本(新鲜花粉/储存花粉)、温室空气悬浮颗粒收集物(滤膜截留物)、实验室保存毒源标样(冻干粉/-80℃保存液氮样品)

检测方法

1.电子显微镜观察法:采用负染色技术处理样品悬液,通过透射电镜直接观测病毒颗粒形态特征及尺寸参数2.双抗体夹心ELISA法:利用特异性单克隆抗体包被微孔板捕获病毒抗原,酶标二抗显色定量分析3.RT-PCR扩增技术:设计特异性引物针对病毒RNA依赖的RNA聚合酶基因保守区段进行逆转录扩增4.实时荧光定量PCR:采用TaqMan探针法建立标准曲线实现病毒核酸绝对定量分析5.LAMP快速检测法:通过设计6条特异性引物在恒温条件下实现靶序列高效扩增6.核酸斑点杂交法:将待测RNA固定于尼龙膜后与地高辛标记的cDNA探针进行特异性杂交7.生物接种指示法:采用昆诺藜或本氏烟作为敏感寄主进行机械摩擦接种观察系统侵染症状8.超速离心纯化法:通过差速离心结合蔗糖密度梯度离心分离提纯病毒粒子

检测标准

ISO16140-4:2020微生物检测方法验证规范-第4部分:植物病原体分子检测方法验证协议GB/T36811-2018植物病毒分子检测通用技术要求SN/T2127-2015进出境种苗番茄黑环病毒检疫鉴定规程EPPOPM7/119(2)欧洲植物保护组织检疫性病毒诊断标准AS5013.15-2012食品微生物学检验-植物源性食品中病毒检测通则NY/T401-2000蔬菜种子产地检疫规程-茄科作物病害检验GB/T3543.5-1995农作物种子检验规程真实性和品种纯度鉴定ISO21571:2005食品与动物饲料中转基因生物和衍生产品的核酸提取方法AOACOfficialMethod2005.08植物病原体实时荧光PCR定性分析方法验证指南JISK3850-3:2016空气中微生物采集与测定-第3部分:植物病原真菌及病毒气溶胶采样

检测仪器

1.透射电子显微镜(TEM):配备CCD成像系统用于病毒颗粒形态学鉴定及粒径测量2.实时荧光定量PCR仪:支持TaqMan探针法的96孔模块实现高通量核酸定量分析3.超速离心机:配备角转子和水平转子完成病毒粒子梯度纯化及浓缩4.全自动酶标仪:集成波长扫描功能实现ELISA板孔吸光度精确读取5.冷冻切片机:配置低温样品台制备植物组织超薄切片用于原位杂交6.核酸蛋白测定仪:采用紫外分光光度法快速测定RNA纯度及浓度7.PCR梯度热循环仪:具备温度梯度功能优化不同引物退火温度参数8.生物安全柜:提供二级生物防护保障活体病毒操作安全性

检测流程

1、咨询:提品资料(说明书、规格书等)

2、确认检测用途及项目要求

3、填写检测申请表(含公司信息及产品必要信息)

4、按要求寄送样品(部分可上门取样/检测)

5、收到样品,安排费用后进行样品检测

6、检测出相关数据,编写报告草件,确认信息是否无误

7、确认完毕后出具报告正式件

8、寄送报告原件

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